Впрочем, можно сказать, что поражающая своей точностью технология выявления инфицированных клеток стала побочным продуктом находки комбинации препаратов, способных очень эффективно активировать ВИЧ в пораженных клетках. Этими препаратами оказались бриостатин, лактон из группы макролидов, выделенный еще в 60-х годах из организма Bugula neritina, способный воздействовать на протеинкиназу-С, а также производное ингенола сложное вещество растительного происхождения, показавшее, кроме всего, высокий противораковый потенциал. Эти препараты «будят» ВИЧ в разных типах клеток, затрагивая все виды резервуаров ВИЧ в крови человека.
Достигнув успеха с активацией резервуаров, ученые использовали наработки прошлых лет, и, соединив полихромную проточную цитометрию с методикой FISH (Patterson и др., 2001) получили инструмент, способный обнаруживать в крови пациентов клетки, содержащие РНК и белки ВИЧ с точностью до 0,5 на 1000000.
Когда настоящим ученым в руки попадает такой мощный инструмент, их сложно остановить, и команда из Монреаля тут же произвела целый каскад важных находок: они обнаружили значимые различия в структуре поражения разных типов клеток-резервуаров у людей с различной длительностью ВИЧ-инфекции; были обнаружены специфические особенности инфицированных ВИЧ клеток маркеры истощения PD-1, CTLA-4 и TIGIT; была подтверждена повышенная чувствительность активированных клеток к проникновению в них ВИЧ; возникли основания полагать, что экспрессия ингибирующих ВИЧ рецепторов связана со склонностью таких клеток к вирусной транскрипции.
Использовав новую технологию, ученые существенно уточнили оценки размеров резервуаров ВИЧ, а также обнаружили неожиданно широкие различия размеров резервуаров у людей с достигнутой на фоне АРВТ супрессией ВИЧ. Возможность обнаруживать непосредственно на клетках и РНК ВИЧ, и gag белки ВИЧ позволяет фенотипировать пораженные клетки, что даст огромный материал для более глубокого понимания природы и течения ВИЧ-инфекции, а значит, и открывает новые пути к борьбе с вирусом.
В скором будущем технология будет воспроизведена во многих лабораториях мира, что неизбежно даст огромный массив данных, способных значительно углубить современный уровень знаний о ВИЧ-инфекции. Разработанная технология обещает быть относительно недорогой, и это дает некоторые основания ожидать проникновения ее и в клиническую практику, что позволит вывести персонализацию терапии ВИЧ-инфекции на качественно новый уровень.
*************
«Single-Cell Characterization of Viral Translation-Competent Reservoirs in HIV-Infected Individuals» | https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/27545045 |
|
